Terapia celular em doenças crônicas do fígado e do pâncreas

Este projeto de pesquisa busca inserir-se na necessidade de diversificar e aprimorar as atuais abordagens terapêuticas para doenças crônicas de incidência crescente na população mundial, como aquelas que afetam o fígado (cirrose) e o pâncreas (diabetes).

Hábitos alimentares relacionados à ingesta da dieta ocidental e de álcool, bem como o perfil genético tem favorecido o surgimento de esteatose e cirrose hepática e diabetes, doenças crônicas que causam grande impacto na saúde pública.

Recentemente, o produto de secreção das células-tronco mesenquimais (CTMs) de tecido adiposo tem demonstrado efeitos terapêuticos em diversos modelos experimentais dessas doenças. A facilidade de obtenção dessas células e suas características biológicas como baixa imunogenicidade e perfil secretor anti-inflamatório tem despertado grande interesse em seu potencial terapêutico. Entretanto, os meios pelos quais essas melhoras ocorrem são pouco conhecidos, e estudos indicam que é preciso aprimorar as técnicas de cultivo dessas células-tronco a fim de obter aproveitamento máximo na regeneração desses órgãos.

Para que esse modelo possa ser convertido em uma abordagem clínica futuramente, é necessário caracterizar o secretoma das CTMs e seus efeitos nos órgãos-alvo.

Portanto, neste estudo utilizaremos técnicas de aprimoramento de cultivo das CTMs desenvolvidas no Laboratório de Pesquisa em Células-Tronco (LPCT), como o cultivo tridimensional a partir de diversos substratos, para obter e caracterizar seu secretoma por análises moleculares.

O secretoma será inoculado em camundongos com fibrose hepática colestática induzida por ligadura do ducto biliar ou diabetes tipo I induzida por estreptozotocina. Os animais serão avaliados quanto a parâmetros plasmáticos e os fígados ou pâncreas serão investigados por análises morfológicas e moleculares, tendo suas subpopulações celulares, taxa de apoptose/necrose, estresse oxidativo e perfil de citocinas caracterizados por citometria de fluxo no LPCT.

Além disso, através das culturas de hepatócitos da linhagem HepG2 e modelo de lesão in vitro semelhante à colestática, poderemos analisar diretamente os efeitos do secretoma sobre o metabolismo de hepatócitos.

A partir desses resultados, esperamos elaborar protocolos mais definidos e avançados de dose, tempo e via de administração do secretoma de CTMs, identificado os pontos-chave de análise dos efeitos desta terapia em nossos modelos experimentais, como etapa fundamental de ensaios pré-clínicos futuramente.